紀要論文 Effects of Cinnamomi Cortex on the production of allergic and inflammatory mediators in RBL-2H3 and RAW264 cells
RBL-2H3およびRAW264細胞株を用いたケイヒの抗アレルギー作用および抗炎症作用の検討

渥美, 聡孝  ,  田中, 拓也  ,  大塚, 功  ,  垣内, 信子  ,  鳥居塚, 和生  ,  あつみ, としゆき  ,  たなか, たくや  ,  かきうち, のぶこ  ,  とりいづか, かずお  ,  Toshiyuki, ATSUMI  ,  Takuya, Tanaka  ,  Nobuko , KAKIUCHI  ,  Kazuo, Toriizuka

内容記述
桂皮(ケイヒ)は日本薬局方に収載される生薬で,抗アレルギーや解熱鎮痛炎症薬とみなされる漢方処方に配剤される.我々はケイヒの抗アレルギー作用および抗炎症作用について調査し,活性成分の同定を行った.ケイヒを70%メタノールで抽出し(Cin70M),シリカゲルカラムクロマトグラフィー(CC)およびオクタデシルシリルCCを用いて成分を分離した.分離した画分はin vitroでの実験としてラット好塩基球性白血病細胞株(RBL-2H3)およびマウスマクロファージ細胞株(RAW264)を用い,それらが産生するサイトカインmRNAの発現率によって抗アレルギーおよび抗炎症活性を示す画分を明らかにした.また,抗アレルギー作用においては,RBL-2H3の脱顆粒率を測定するために細胞培養液中のβ - ヘキソサミニダーゼも測定した.Cin70Mとシンナムアルデヒド(CNMA)はRBL-2H3細胞における脱顆粒およびインターロイキンのmRNA発現を阻害した.CNMAは300μMで脱顆粒を抑制し,その抑制作用はポジティブコントロールとして用いたケトチフェンより僅かに強かった.同様にCin70MとCNMA はRAW264が産生した一酸化窒素(NO)および炎症性サイトカインmRNA発現を抑制した.特にNO産生についてはCNMA 100μMで10μMのデキサメタゾンと同等の抑制作用を示した.ケイヒの特徴である甘い味と芳香は明らかにした活性成分の一つであるCNMAに由来する.今回の結果から,アレルギー疾患や炎症性疾患の患者に対し,ケイヒを含む漢方薬が処方された際には甘い味と芳香が強いケイヒを選んだ方が良いことが示された.
Cinnamomi Cortex (cinnamon bark) is a major crude drug. In Japan, it is used in Kampo medicine to treatallergic and inflammatory diseases. In this study, we examined the anti-allergic and anti-inflammatoryeffects of Cinnamomi Cortex and attempted to identify its active components. Cinnamomi Cortex wasextracted with 70% methanol (Cin70M) and separated into fractions via silica gel column chromatography(CC) or octadecylsilan (ODS) CC. In order to select fractions that have anti-allergic and anti-inflammatoryactivities, we evaluated the ability of the fractions to inhibit the expression of cytokine genes in vitro byusing a rat basophilic leukemia (RBL-2H3) cell line and mouse macrophage (RAW264) cell line. Geneexpression levels were assessed in both cell lines by using semi-quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction (RT-PCR), and the RBL-2H3 degranulation ratio was quantified via ???? -hexosaminidase assay. Cin70M and cinnamaldehyde (CNMA) inhibited degranulation and the mRNAexpression of interleukins in RBL-2H3 cells. CNMA inhibited degranulation at 300 ????M, and its inhibitoryeffects were slightly stronger than those of ketotifen which is a typical anti-allergic drug. In RAW264 cells,nitric oxide (NO) production and the mRNA expression of inflammatory cytokines were reduced byCin70M and CNMA. In the NO production assay, 100 ????M CNMA was found to significantly decrease NOproduction from activated RAW264 cells, and its activity was the same as that of 10 ????M dexamethasone.The taste and scent of Cinnamomi Cortex were both attributed to CNMA. The results of the presentstudy indicate that it is more beneficial for patients with allergic and/or inflammatory diseases to useCinnamomi Cortex with a strong taste and scent.
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