Research Paper ScFv化抗テネイシンC抗体による心疾患の分子標的イメージング診断法の確立

下條, 尚志  ,  SHIMOJO, Naoshi

2015-05-29 , 三重大学
Description
テネイシン-C(TN-C)は虚血性心疾患などの炎症部位に一過性に高発現する。TN-Cを特異的に認識する抗体を用いて、分子診断薬として改良可能かどうかを検証した。ハイブリドーマのRNAから抗TN-C抗体のH鎖可変領域(VH)とL鎖可変領域(VL)遺伝子をクローニングし、重複伸長PCRを行い、VH-linker-VL遺伝子(scFv遺伝子)を大腸菌、in vitroセルフリー(RTS小麦胚芽)の発現系、哺乳類細胞株(HEK293)へそれぞれ遺伝子導入した。その結果、HEK293において最も多く発現量が得られた。準備が整い次第、心筋炎モデル動物に注入して病巣への集積を確認する予定である。
Tenascin-C (TN-C) is expressed transiently inflammatory regions in various cardiovascular diseases. We investigated the possibility that specific antibody against TN-C is useful for detecting cardiovascular diseases as a molecular diagnostic reagent. Heavy chain variable region (VH) and light chain variable region (VL) genes of anti-TN-C antibody were obtained from total RNA in hybridoma, and were performed overlap-extended PCR. Expression vector inserted VH-linker-VL gene (scFv) was used in E. coli, in vitro cell free (RTS wheat germ) and mammalian cell line (HEK293) expression systems. As a result, the antibody expression was highly effective in HEK293 cell line system. As soon as it’s ready, we are planning to experiments of antibody accumulation in foci of myocarditis model mice.
2012年度~2014年度科学研究費補助金(若手研究(B))研究成果報告書
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